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Module 6

Pipelines transcriptomiques

Préparer une librairie RNA-Seq, quantifier avec featureCounts, normaliser, tester avec DESeq2 et interpréter un enrichissement fonctionnel.

5 sections · environ 5 h de travail

Objectifs du module

  • Identifier les biais d'une librairie RNA-Seq
  • Compter les lectures par gène avec la bonne stratégie de brin
  • Choisir une normalisation adaptée à la question
  • Exécuter et interpréter une analyse différentielle DESeq2
  • Réaliser un enrichissement GO avec contrôle du FDR
  1. 6.1Préparation de librairie RNA-Seq et quantification55 min · intermediaire · RNA-Seq, librairie, ARNrPrérequis : 3.1
  2. 6.2featureCounts55 min · intermediaire · featureCounts, GTF, GFFPrérequis : 6.1, 3.3
  3. 6.3Normalisation55 min · intermediaire · CPM, TPM, FPKMPrérequis : 6.2
  4. 6.4DESeq265 min · avance · DESeq2, binomiale négative, dispersionPrérequis : 6.3
  5. 6.5Enrichissement GO55 min · intermediaire · Gene Ontology, test hypergéométrique, odds ratioPrérequis : 6.4